Serumda Steroid Hormon
LC-MS/MS Analizi Kiti
Steroid hormonlar, düşük konsantrasyonlarda bile önemli vücut süreçlerinde yer alan etkili biyolojik haberciler olarak tanımlanır. Bu nedenle, geniş bir steroid hormon panelinin güvenilir ve eşzamanlı analizi, konjenital adrenal hiperplazi (KAH) gibi steroid biyosentezindeki kusurlardan kaynaklanan endokrin bozuklukların saptanmasında yararlı olabilecek hormon profilinin araştırılmasında hayati bir rol oynar. Vücut sıvılarındaki steroid hormonlarının ölçümünde immünoassay tekniklerinin kısıtlamaları ve eksiklikleri nedeniyle, LC-MS/MS tekniği giderek çok sınıflı steroid hormon tespiti için tercih edilen bir yöntem haline gelmektedir.
-
Kit Özellikleri
Tek bir enjeksiyonda klinik olarak önemli 16 steroid hormonunun analizi
Toplam analiz süresi 16 dk
Tüm steroid hormonları için tek numune hazırlığı. SPE kullanmaksızın, numune hazırlığı için protein çöktürmesinin ardından kolay sıvı-sıvı ekstraksiyon işlemi
Önemli steroid hormonlarının kendi izotop etiketli iç standartlarını kapsar-11 adet iç standart
Uzun ömürlü HPLC kolonu -
Parametreler
11-Deoksikortikosteron, 11-Deoksikortizol, 17-α-Hidroksipregnenolon, 17-α-Hidroksiprogesteron, Aldosteron, Androstene-3,17-dion, Androsteron, Kortikosteron, Kortizol, DHEA, DHEAS, Dihidrotestosteron, Progesterenolone, Pregnenolon, Estradiol ve Testosteron -
Numune Türü
Serum/Plazma
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Bir cam tüp içerisine (tüp-1) 425 µl serum/plazma numunesi/kalibratör/kontrol pipetleyin ve 25 µl iç standart karışım ekleyin, 5 s vorteksleyin
-
Aşama 2Tüp-1’e 450 µl Reaktif-1 ekleyin ve 15 s vorteksleyin. Ardından 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
-
Aşama 3Süpernatantı yeni bir cam santrifüj tüpüne (tüp-2) aktarın
-
Aşama 4Tüp-1’deki çökeltiyi 1,5 mL Reaktif-2 ile yıkayın (iki kez!) ve yıkama sıvılarını tüp-2’ye aktarın
-
Aşama 5Tüp-2’yi 3 dk çalkalayın ve 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
-
Aşama 62.4 ml üst fazı yeni bir cam tüpe (tüp-3) aktarın ve azot akışı altında uçurun (Üst faz, 30 °C sıcaklıkta su banyosu kullanılarak ~15 dakika boyunca 7 psi’de buharlaştırılabilir)
-
Aşama 7Tüp-3’ü 100 µl Reaktif-3 ile rekonstitüe edin ve bir HPLC vialine aktarıp sisteme enjekte edin
-
KROMATOGRAM
-
METOT PERFORMANS
Analit
LOQ (ng/mL) 6460 QQQ
LOQ (ng/mL) Ultivo
Doğrusallık (R2) 6460 QQQ
Geri Kazanım % 6460 QQQ
Tekrarlanabilirlik %RSD (%) 6460 QQQ
11-Deoksikortikosteron
0,016
0,123
95.34
6.84
0.994
11-Deoksikortizol
0,015
0,049
102.23
4.45
0.998
17-Hidroksipregnenolon
0,145
1,251
100.44
9.24
0.997
17-Hidroksiprogesteron
0,028
0,078
97.01
4.80
0.997
4-Androstene 3,17-dion
0,023
0,193
109.93
1.99
0.998
Aldosteron
0,011
0,100
99.81
6.34
0.998
Androsteron
0,035
0,235
93.70
13
0.994
Kortikosteron
0,054
0,424
98.42
4.09
0.998
Kortizol
0,102
0,694
89.74
1.69
0.999
DHEA
0,102
0,328
109.62
6.66
0.998
DHEAS
4,945
38,012
103.47
2.63
0.997
Dihidrotestosteron
0,012
0,263
101.98
14.36
0.997
Estradiol (Östradiol)
0,015
0,227
109.37
6.32
0.998
Pregnenolon
0,033
0,370
77.49
10.46
0.994
Progesteron
0,033
0,079
108.37
4.45
0.994
Testosteron
0,008
0,027
96.75
1.80
0.997