Kantitatif Amino Asit Analiz Kiti

Kantitatif Amino Asit LC-MS/MS Analiz Kiti

Son yıllarda artan metabolomik çalışmalar, potansiyel hastalık tanı belirteçlerini keşfetmede ve vücut sıvılarındaki belirli metabolit seviyelerindeki dalgalanmaları gözlemlemede önemli kolaylıklar sağlamaktadır. Bu yeni metodolojilerin uygulanmasıyla amino asitler gibi hastalıklarla ilişkili çeşitli metabolitlerin, tanısal biyobelirteç adayları olarak tanımlanması sağlanabilmektedir. Amino asitlerin metabolik düzenlemelerdeki (protein sentezi, nörotransmisyon, hormon salgılanması ve bağışıklık) hayati rolleri nedeniyle, metabolik durumun anlık görüntüsünü alırken önemli hedefler haline gelmiştir.

Bu nedenle, dolaşımdaki amino asit profili değişikliklerinin güvenilir analiz yöntemi kullanılarak aydınlatılması sadece metabolik hastalıklarda değil, otizm, prostat kanseri, Huntington hastalığı, Parkinson hastalığı, Alzheimer hastalığı, obezite, tip 2 diyabet, karaciğer sirozu, majör depresif bozukluk ve kardiyovasküler hastalık gibi bazı rahatsızlıklarda da ışık tutabilir.

  • Kit Özellikleri

    • Türevlendirme yapılmaksızın 43 amino asitin kantitatif sonucu için toplam analiz süresi 7,5 dk. MSUD (Akçaağaç Şurubu İdrar Hastalığı) için 11 dk’lık ekstra enjeksiyon ile allo-İzolösin belirlenmesi gerekir (Lösin/İzolösin/allo-İzolösin)
    • Tüm amino asitler için tek numune hazırlığı-her iki yöntem için tek bir HPLC viali
    • Örnek hazırlamada sadece birkaç pipetleme işlemi; plazma/serum “protein çöktür ve enjekte et”, idrar için “seyrelt ve enjekte et”
    • Klinik olarak önemli amino asitlerin kendi izotop etiketli iç standartlarının kullanımı
    • Düşük hacimli hasta numunesine uygulanabilirliği
    • 10000 enjeksiyona kadar HPLC kolonunun kullanım ömrü
  • Parametreler

    1-Metilhistidin, 2-Aminoadipik asit, 2-Aminobütirik asit, 3-Aminoizobütirik asit, 3-Metilhistidin, 4-Aminobütirik asit, 5-hidroksilizin, Alanin, Allo-izolösin, Anserin, Arjinin, Arjininosüksinik asit, Asparajin, Aspartik asit, Beta-Alanin, Karnozin, Sitrülin, Sistatiyonin, Sistin, Etanolamin, Glutamik asit, Glutamin, Glisin, Histidin, Homositrülin, Homosistin, İzolösin, Lösin, Lizin, Metiyonin, Norvalin, Ornitin, O-Fosforiletanolamin, O-Fosfoserin, Fenilalanin, Prolin, Sarkozin, Serin, Taurin, Treonin, Trans-4-hidroksiprolin, Triptofan, Tirozin ve Valin.

  • Numune Türü

    • Serum/Plazma
    • İdrar

Plazma/Serum Numune Hazırlığı


  • Aşama 1

    Bir cam tüpe 50 μL serum/plazma hasta numunesi/kalibratör/kontrol pipetleyin

  • Aşama 2

    50 μL iç standart solüsyonu ekleyin ve 5 s vorteksleyin

  • Aşama 3

    700 μL Reaktif-1 ekleyin, 5 s vorteksleyin, ardından 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin

  • Aşama 4

    Süpernatantı HPLC vialine aktarın ve sisteme enjekte edin

İdrar Numune Hazırlığı


  • Aşama 1

    Bir cam tüpe 100 μL idrar örneğini pipetleyin ve 900 μL HPLC kalite su ile seyreltin

  • Aşama 2

    Diğer bir cam tüpe 50 μL seyreltilmiş idrar örneğini pipetleyin

  • Aşama 3

    50 μL iç standart solüsyonu ekleyin ve 5 s vorteksleyin

  • Aşama 4

    700 μL Reaktif-1 ekleyin, 5 s vorteksleyin, ardından 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin

  • Aşama 5

    Süpernatantı HPLC vialine aktarın ve sisteme enjekte edin

  • Örnek kromatogram

     

  • Metot Performans

    Analit LOQ (μmol/L) 6460 QQQ Doğruluk % 6460 QQQ Tekrarlanabilirlik % CV 6460 QQQ Doğrusallık (R2) 6460 QQQ
    1-Metilhistidin 0,2 85,3 2,94 0,9996
    2-Aminoadipik asit 0,83 93,67 2,37 0,9992
    2-Aminobütirik asit 0,22 93,67 4,12 0,9998
    3-Aminoizobütirik asit 0,15 98,93 7,55 0,9995
    3-Metilhistidin 0,3 99,87 4,19 0,9992
    4-Aminobütirik asit 0,07 102,62 5,41 0,9994
    5-hidroksilizin 0,3 102,78 1,54 0,9988
    Alanin 6,82 105,04 4,19 0,9988
    Allo-izolösin 0,22 98,3 1,65 0,9998
    Anserin 0,21 106,86 4,13 0,9998
    Arjinin 0,15 103,88 3,98 0,9998
    Arjininosüksinik asit 0,62 93,04 2,97 0,9981
    Asparajin 0,46 86,17 3,09 0,9997
    Aspartik asit 1,06 91,19 3,44 0,9956
    Beta-Alanin 1 91,84 9,11 0,999
    Karnozin 0,12 96,08 3,97 0,9984
    Sitrülin 0,51 82,47 3,44 0,9977
    Sistatiyonin 0,25 104,65 4,75 0,9997
    Sistin 0,97 95,82 4,63 0,9998
    Etanolamin 0,56 104,25 5,67 0,9944
    Glutamik asit 0,24 97,88 6,1 0,999
    Glutamin 0,32 98,03 3,37 0,9999
    Glisin 9,03 95,82 1,93 0,9984
    Histidin 2,43 107 1,12 0,9999
    Homositrülin 0,89 104,4 3,71 0,9993
    Homosistin 0,31 102,82 4,8 0,999
    İzolösin 0,22 110,92 1,39 0,9991
    Lösin 0,2 92,22 4,85 0,9997
    Lizin 0,09 113,46 5,12 0,9988
    Metiyonin 0,41 87,42 1,88 0,9999
    Norvalin 0,15 93,51 4,94 0,9988
    Ornitin 1,39 93,34 3,54 0,9996
    O-Fosforiletanolamin 2,56 87 4,28 0,9976
    O-Fosfoserin 0,12 83,96 4,49 0,9969
    Fenilalanin 0,73 108,04 3,05 0,997
    Prolin 0,67 99,84 3,3 0,9998
    Sarkozin 4,38 110,03 2,25 0,9964
    Serin 0,89 99,26 4,58 0,997
    Taurin 5,47 85,09 5,28 0,9956
    Treonin 0,72 95,03 3,27 0,9999
    Trans-4-hidroksiprolin 0,28 87,8 1,9 0,9914
    Triptofan 0,23 109,81 3,21 0,9998
    Tirozin 3,34 101,19 3,45 0,9991
    Valin 5,11 98,65 6,08 0,9986