K Vitamini LC-MS/MS
K Vitamini LC-MS/MS Analiz Kiti
K vitamini, K vitaminine bağımlı Gla proteinlerinde glutamik asit kalıntılarının (Glu) gama-karboksiglutamik asit kalıntılarına (Gla) enzimatik modifikasyonu için bir kofaktördür. Bu Gla proteinleri hemostaz, kemik metabolizması, vasküler kalsifikasyon ve hücre proliferasyonu için gereklidir. K vitamini doğada yeşil yapraklı sebzelerde, alglerde ve bazı bitkisel yağlarda filokinon (K1 vitamini) olarak bulunur ve menakinonlar (K2 vitamini MK-n olarak da adlandırılır, burada n izoprenoid birimlerinin sayısıdır) et, yumurtada ve fermente gıdalar bulunabilir. K vitamini menadionunun sentetik bir formu (K3 vitamini) olarak bazı hayvan yemlerinde katkı maddesi olarak bulunabilir.
-
Kit Özellikleri
K vitamininin 5 formunun konsantrasyonlarının eş zamanlı ölçümü
Toplam analiz süresi 12 dk
Tüm formlar için tek numune hazırlama, numune hazırlığında SPE kullanmaksızın protein çöktürmesinin ardından kolay sıvı-sıvı ekstraksiyon adımı
Uzun ömürlü HPLC kolonu -
Parametreler
Vitamin K1-Filokinon, Vitamin K1-2,3-Epoksit, Vitamin K2-7-Menakinon, Vitamin K2-2,3-Epoksit ve Vitamin K2-4-Menakinon -
Numune Türü
Serum/Plazma
Numune Hazırlama
-
Aşama 1400 μL serum numunesi/kalibratör bir cam santrifüj tüpüne (tüp-1) pipetleyin
-
Aşama 2800 μL Reaktif 1 ekleyin, 5 s vorteksleyin
-
Aşama 325 μL iç standart solüsyonu ekleyin, ardından 2 ml Reaktif-2 ekleyin ve 3 s vorteksleyin
-
Aşama 44000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
-
Aşama 52.4 ml üst fazı yeni bir cam tüpe (tüp-2) aktarın ve azot akışı altında buharlaştırın. (Üst faz, 30 °C sıcaklıktaki su banyosu kullanılarak ~15 dakika boyunca 7 psi’de buharlaştırılabilir)
-
Aşama 6Tüp-2’yi 100 µl Reaktif-3 ile çözün ve bir HPLC vialine aktarın, sisteme enjekte edin
-
KROMATOGRAM