Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti
Açilkarnitinler, amino ve yağ asitlerinin parçalanmasından türetilen L-karnitin’in asetillenmiş formlarıdır. Açilkarnitin analizi, mitokondriyal yağ asidi β-oksidasyonu ve organik asit metabolizması bozukluklarının biyokimyasal tespiti için yapılır. Açilkarnitin analizi ile ortaya çıkan koşullar, ortak olarak, farklı hücre içi bölmelerde ifade edilen birkaç karnitin açil-CoA transferazından biri için substratlar olan kısa, orta ve/ veya uzun zincirli açil-CoA türlerinin birikimine sahiptir.
Son zamanlarda, açilkarnitin formlarını ölçmek için bir sıvı kromatografik (LC) ayırma adımını içeren MS/MS yöntemlerine olan yönelim artmaktadır. Jasem Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti karnitin/açilkarnitinlerin kantitatif analizinin yanı sıra total C0’ın kantitatif analizine de çözüm sunmaktadır.
-
Kit Özellikleri
Serum/plazma matrisinde serbest karnitin/açilkarnitinin 10 dk’da kantitatif analizi
Numune hazırlama için sadece birkaç pipetleme adımı; protein çöktür ve enjekte et
Yalnızca toplam karnitin tayini için basit bir hidroliz adımı
Kararlı izotop etiketli iç standart kullanımı
Düşük hacimli hasta numunesi
Uzun ömürlü HPLC analitik kolonu -
Parametreler
Karnitin (serbest)-C0, Asetilkarnitin-C2, Propiyonilcarnitin-C3, Butirilkarnitin-C4,
İzovalerilkarnitin-C5, Hekzanoilkarnitin-C6, Oktanoilkarnitin-C8, Dekanoilkarnitin-C10,
Dodekanoilkarnitin-C12, Tetradekanoilkarnitin-C14, Hekzadecanoilkarnitin-C16,
Oktadekanoilkarnitin-C18 ve Oktadekenoilkarnitin-C18:1 -
Numune Türü
Serum/Plazma
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Serbest Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
50 µL serum/plazma numunesi bir cam santrifüj tüpüne alınır -
Aşama 2Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
-
Aşama 3Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 4Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Toplam Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
Bir ependorf tüp içerisine 50 µL of serum/plazma numunesi alınır -
Aşama 250 µL reaktif-2 (hidroliz için) eklenir ve 5 s vortekslenir, ardından 65 oC’de 15 dk inkübe edilir.
-
Aşama 350 µL reaktif-3 eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 450 µL hidrolizat bir cam santrifüj tüpüne alınır
-
Aşama 5Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
-
Aşama 6Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 7Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
-
KROMATOGRAM
-
METOT PERFORMANS