
Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti
Açilkarnitinler, amino ve yağ asitlerinin parçalanmasından türetilen L-karnitin’in asetillenmiş formlarıdır. Açilkarnitin analizi, mitokondriyal yağ asidi β-oksidasyonu ve organik asit metabolizması bozukluklarının biyokimyasal tespiti için yapılır. Açilkarnitin analizi ile ortaya çıkan koşullar, ortak olarak, farklı hücre içi bölmelerde ifade edilen birkaç karnitin açil-CoA transferazından biri için substratlar olan kısa, orta ve/ veya uzun zincirli açil-CoA türlerinin birikimine sahiptir.
Son zamanlarda, açilkarnitin formlarını ölçmek için bir sıvı kromatografik (LC) ayırma adımını içeren MS/MS yöntemlerine olan yönelim artmaktadır. Jasem Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti karnitin/açilkarnitinlerin kantitatif analizinin yanı sıra total C0’ın kantitatif analizine de çözüm sunmaktadır.
Kit Özellikleri
Numune hazırlama için sadece birkaç pipetleme adımı; protein çöktür ve enjekte et
Yalnızca toplam karnitin tayini için basit bir hidroliz adımı
Kararlı izotop etiketli iç standart kullanımı
Düşük hacimli hasta numunesi
Uzun ömürlü HPLC analitik kolonu
Parametreler
İzovalerilkarnitin-C5, Hekzanoilkarnitin-C6, Oktanoilkarnitin-C8, Dekanoilkarnitin-C10,
Dodekanoilkarnitin-C12, Tetradekanoilkarnitin-C14, Hekzadecanoilkarnitin-C16,
Oktadekanoilkarnitin-C18 ve Oktadekenoilkarnitin-C18:1
Numune Türü
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Serbest Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
50 µL serum/plazma numunesi bir cam santrifüj tüpüne alınır -
Aşama 2Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
-
Aşama 3Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 4Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Toplam Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
Bir ependorf tüp içerisine 50 µL of serum/plazma numunesi alınır -
Aşama 250 µL reaktif-2 (hidroliz için) eklenir ve 5 s vortekslenir, ardından 65 oC’de 15 dk inkübe edilir.
-
Aşama 350 µL reaktif-3 eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 450 µL hidrolizat bir cam santrifüj tüpüne alınır
-
Aşama 5Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
-
Aşama 6Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
-
Aşama 7Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir

KROMATOGRAM
