Kantitatif Amino Asit LC-MS/MS Analiz Kiti
Son yıllarda artan metabolomik çalışmalar, potansiyel hastalık tanı belirteçlerini keşfetmede ve vücut sıvılarındaki belirli metabolit seviyelerindeki dalgalanmaları gözlemlemede önemli kolaylıklar sağlamaktadır. Bu yeni metodolojilerin uygulanmasıyla amino asitler gibi hastalıklarla ilişkili çeşitli metabolitlerin, tanısal biyobelirteç adayları olarak tanımlanması sağlanabilmektedir. Amino asitlerin metabolik düzenlemelerdeki (protein sentezi, nörotransmisyon, hormon salgılanması ve bağışıklık) hayati rolleri nedeniyle, metabolik durumun anlık görüntüsünü alırken önemli hedefler haline gelmiştir. Bu nedenle, dolaşımdaki amino asit profili değişikliklerinin güvenilir analiz yöntemi kullanılarak aydınlatılması sadece metabolik hastalıklarda değil, otizm, prostat kanseri, Huntington hastalığı, Parkinson hastalığı, Alzheimer hastalığı, obezite, tip 2 diyabet, karaciğer sirozu, majör depresif bozukluk ve kardiyovasküler hastalık gibi bazı rahatsızlıklarda da ışık tutabilir.
-
Kit Özellikleri
Türevlendirme yapılmaksızın 43 amino asitin kantitatif sonucu için toplam analiz süresi 7,5 dk. MSUD (Akçaağaç Şurubu İdrar Hastalığı) için 11 dk’lık ekstra enjeksiyon ile allo-İzolösin belirlenmesi gerekir (Lösin/İzolösin/allo-İzolösin)
Tüm amino asitler için tek numune hazırlığı-her iki yöntem için tek bir HPLC viali
Örnek hazırlamada sadece birkaç pipetleme işlemi; plazma/serum “protein çöktür ve enjekte et”, idrar için “seyrelt ve enjekte et”
Klinik olarak önemli amino asitlerin kendi izotop etiketli iç standartlarının kullanımı
Düşük hacimli hasta numunesine uygulanabilirliği
10000 enjeksiyona kadar HPLC kolonunun kullanım ömrü -
Parametreler
1-Metilhistidin, 2-Aminoadipik asit, 2-Aminobütirik asit, 3-Aminoizobütirik asit, 3-Metilhistidin, 4-Aminobütirik asit, 5-hidroksilizin, Alanin, Allo-izolösin, Anserin, Arjinin, Arjininosüksinik asit, Asparajin, Aspartik asit, Beta-Alanin, Karnozin, Sitrülin, Sistatiyonin, Sistin, Etanolamin, Glutamik asit, Glutamin, Glisin, Histidin, Homositrülin, Homosistin, İzolösin, Lösin, Lizin, Metiyonin, Norvalin, Ornitin, O-Fosforiletanolamin, O-Fosfoserin, Fenilalanin, Prolin, Sarkozin, Serin, Taurin, Treonin, Trans-4-hidroksiprolin, Triptofan, Tirozin ve Valin. -
Numune Türü
Serum/Plazma, İdrar
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Bir cam tüpe 50 μL serum/plazma hasta numunesi/kalibratör/kontrol pipetleyin
-
Aşama 250 μL iç standart solüsyonu ekleyin ve 5 s vorteksleyin
-
Aşama 3700 μL Reaktif-1 ekleyin, 5 s vorteksleyin, ardından 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
-
Aşama 4Süpernatantı HPLC vialine aktarın ve sisteme enjekte edin
Numune Hazırlama
-
Aşama 1Bir cam tüpe 100 μL idrar örneğini pipetleyin ve 900 μL HPLC kalite su ile seyreltin
-
Aşama 2Diğer bir cam tüpe 50 μL seyreltilmiş idrar örneğini pipetleyin
-
Aşama 350 μL iç standart solüsyonu ekleyin ve 5 s vorteksleyin
-
Aşama 4700 μL Reaktif-1 ekleyin, 5 s vorteksleyin, ardından 4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
-
Aşama 5Süpernatantı HPLC vialine aktarın ve sisteme enjekte edin
-
KROMATOGRAM
-
METOT PERFORMANS
Analit
LOQ (μmol/L) 6460 QQQ
Doğruluk % 6460 QQQ
Tekrarlanabilirlik % CV 6460 QQQ
Doğrusallık (R2) 6460 QQQ
1-Metilhistidin
0,2
85,3
2,94
0,9996
2-Aminoadipik asit
0,83
93,67
2,37
0,9992
2-Aminobütirik asit
0,22
93,67
4,12
0,9998
3-Aminoizobütirik asit
0,15
98,93
7,55
0,9995
3-Metilhistidin
0,3
99,87
4,19
0,9992
4-Aminobütirik asit
0,07
102,62
5,41
0,9994
5-hidroksilizin
0,3
102,78
1,54
0,9988
Alanin
6,82
105,04
4,19
0,9988
Allo-izolösin
0,22
98,3
1,65
0,9998
Anserin
0,21
106,86
4,13
0,9998
Arjinin
0,15
103,88
3,98
0,9998
Arjininosüksinik asit
0,62
93,04
2,97
0,9981
Asparajin
0,46
86,17
3,09
0,9997
Aspartik asit
1,06
91,19
3,44
0,9956
Beta-Alanin
1,0
91,84
9,11
0,999
Karnozin
0,12
96,08
3,97
0,9984
Sitrülin
0,51
82,47
3,44
0,9977
Sistatiyonin
0,25
104,65
4,75
0,9997
Sistin
0,97
95,82
4,63
0,9998
Etanolamin
0,56
104,25
5,67
0,9944
Glutamik asit
0,24
97,88
6,1
0,999
Glutamin
0,32
98,03
3,37
0,9999
Glisin
9,03
95,82
1,93
0,9984
Histidin
2,43
107
1,12
0,9999
Homositrülin
0,89
104,4
3,71
0,9993
Homosistin
0,31
102,82
4,8
0,999
İzolösin
0,22
110,92
1,39
0,9991
Lösin
0,2
92,22
4,85
0,9997
Lizin
0,09
113,46
5,12
0,9988
Metiyonin
0,41
87,42
1,88
0,9999
Norvalin
0,15
93,51
4,94
0,9988
Ornitin
1,39
93,34
3,54
0,9996
O-Fosforiletanolamin
2,56
87
4,28
0,9976
O-Fosfoserin
0,12
83,96
4,49
0,9969
Fenilalanin
0,73
108,04
3,05
0,997
Prolin
0,67
99,84
3,3
0,9998
Sarkozin
4,38
110,03
2,25
0,9964
Serin
0,89
99,26
4,58
0,997
Taurin
5,47
85,09
5,28
0,9956
Treonin
0,72
95,03
3,27
0,9999
Trans-4-hidroksiprolin
0,28
87,8
1,9
0,9914
Triptofan
0,23
109,81
3,21
0,9998
Tirozin
3,34
101,19
3,45
0,9991
Valin
5,11
98,65
6,08
0,9986